ÖZ

Amaç

Bu çalışmada İzmir’in farklı ilçelerinde yayılış gösteren Culicoides türlerinin belirlenmesi, moleküler karakterizasyonlarının yapılması ve kanatlı haemosporidian parazitleri yönünden vektörlük potansiyellerinin araştırılması amaçlanmıştır.

Yöntemler

Çalışma materyalini, 2016 yılının Mayıs-Ağustos ayları arasında Bergama, Ödemiş, Kemalpaşa ve Foça ilçelerinden toplanan toplam 800 adet dişi Culicoides örneği oluşturmuştur. Culicoides örneklerinin morfolojik teşhislerini takiben belirlenen her türe ait örnekler moleküler analizlere dahil edilmiştir. Örneklere ait genomik DNA izolatlarının mt-COI gen bölgesi polimeraz zincir reaksiyonunda (PZR) amplifiye edilmiş ve sonraki basamakta amplifikasyon ürünlerinin sekans analizleri gerçekleştirilerek moleküler karakterizasyonları ve filogenetik analizleri yapılmıştır. Tür ve lokasyonuna göre ayrılan örneklerin baş/toraks (BTH) ve abdomenlerinden ayrı havuzlar oluşturularak elde edilen gDNA izolatlarında haemosporidian DNA’sının varlığı nested PZR ile araştırılmış ve tespit edilen parazit nesillerinin sekans analizleri ile moleküler karakterizasyonları yapılmıştır.

Bulgular

Morfolojik teşhis sonuçlarına göre araştırma bölgelerinde C. circumscriptus (%39,4) ve C. imicola’nın (%33,8) en yaygın türler olduğu bunu sırasıyla Culicoides sp. (ERU-Izm-Culi1) (%9,1), C. nubeculosus kompleks (%7,6), C. obsoletus (%4,3), C. gejgelensis (%2,3), C. punctatus (%1,9) ve C. newsteadi’nin (%1,8) izlediği saptanmıştır. Belirlenen türlere ait mt-COI sekansları arasında 18 farklı haplotipi ortaya koyan 175 polimorfik bölge saptanmış olup haplotip çeşitliliği en yüksek C. circumscriptus, C. punctatus ve C. newsteadi’de belirlenmiştir. Filogenetik analizlerde belirlenen Culicoides türlerine ait haplotipler üç major küme içerisinde monofiletik olarak gruplanmıştır. Culicoides circumscriptus BTH’ye ait genomik DNA izolatlarında Haemoproteus sp. GAGLA05 ve H. minutus TURDUS2 nesillerinin varlığı saptanmış ve bu türün araştırma yöresinde ilgili Haemoproteus nesillerinin muhtemel potansiyel vektörü olabileceği ortaya çıkarılmıştır.

Sonuç

Bu çalışma ile İzmir yöresinde yaygınlık gösteren Culicoides türleri entegre morfolojik ve moleküler teşhis yaklaşımlarıyla belirlenerek bu önemli sineklerin moleküler epidemiyolojisi açısından özgün veriler sağlanmıştır. Ayrıca çalışma sonuçları İzmir yöresinde C. circumscriptus’un Haemoproteus nesillerinin nakli açısından potansiyel bir öneme sahip olduğuna dair kanıtlar sağlamıştır.